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1、筋骨草水煎液对慢性宫颈炎的保护作用研究唐洁I，龙之浩2,蔡晓明3(1.四川省遂宁市中医院药剂科；2.川北医学院临床医学系；3.川北医学院基础医学院，四川南充637000)【摘要】目的：研究筋骨草水煎液对大鼠慢性宫颈炎的保护作用及机制。方法：用苯酚胶浆法建立慢性宫颈炎模型，设空白对照组、模型组、筋骨草水煎液组和地塞米松组。观察大鼠活动情况、宫颈组织病理，测定宫颈指数，采用酶联免疫吸附试验法检测宫颈组织中PGE2的含量。结果：筋骨草组与模型组比较减轻了慢性宫颈炎大鼠宫颈组织病变，数据由SPSSI3.0软件分析，慢性宫颈炎筋骨草组PGE2、宫颈指数平均值为707.46pg/ml、0.4762,比模型
2、组降低了11.19%、9.01%,达显著差异水平。结论：筋骨草水煎液可以缓解大鼠慢性宫颈炎症状，其机制可能与降低PGE2的含量有关。【关键词】筋骨草；慢性宫颈炎；保护作用【中图分类号】R711.32【文献标志码】AStudyonprotectiveeffectofwaterdecotionofAjugadecumbensonchroniccervicitisinratsTANGJie11LONGZhiHao2,CAIXiao-ming3(7.PharmacyDepartmentofSuiningtraditionalChinesemedicinehospital;2.DepartmentofC
3、linicalLaboratoryMedicine,NorthSichuanMeicalcollege;3.SchoolofBasicMedicalSciences,NorthSichuanMeicalcollege:Nanchong,637000,Sichuan,China)AbstractObjective:TbstudytheprotectiveeffectsofaqueousextractofAjugadecumbensonchroniccervicitisandthemolecularmechanismofprotectioninrats.Methods:Chroniccervici
4、tisinratswasinducedbyinjectionofphenolmucilagesuspensionintothevagina,ratswererandomlydividedintocontrolgroup,modelgroup,andAjugadecumbens(48、12gkg)groupsanddexamethasone(4mgkg)group.Pathologicalchangesincervicaltissuesofratswereobserved,cervicalindexwasdetected,PGE2wasmeasuredbyELISAmethod.Result:t
5、hePGE2andcervicalindexofAjugadecumbensgroupisonaverage707.46pgmland0.4762,downby11.19%and9.01%comparedwiththemodelgroup,reachingthesignificantdifferencelevel(P0.05).Conclusion:ThesefindingsindicatedthatthewaterdecoctionofAjugadecumbenshasprotectiveactionuponchroniccervicitis,inwhichtheinhibitionofPG
6、E2waspotentialantiphlogisticmechanism.KeywordsAjugadecumbens;Chroniccerviciti；Protectiveeffect宫颈炎为是一种常见的女性生殖系统疾病，临床分为急性和慢性两类，其中以慢性宫颈炎较为常见，临床表现为白带增多、腰痛、下腹坠痛等，严重者会影响日常生活，治疗不及时会导致病情绵长不愈，甚至引起不孕症，目前还认为慢性宫颈炎是诱发宫颈癌的主要原因之一。临床主要采用物理、手术及药物治疗，前两种治疗方法不但很大程度上损伤机体，而且存在白带增多、水样排液、出血等并发症IL局部给药有一定疗效，但只治标不能治本，容易复发，近年来
7、有报道中药口服可以治疗慢性宫颈炎，疗程虽长，却能达到根治的目的，同时不良反应小。筋骨草（AjUgadecumbensThunb.）又称白毛夏枯草、金疮小草、散血草、破血丹、苦草等，广泛分布于全国各地，一年或二年生草本，为唇形科植物，原产于欧亚大陆，该属植物被广泛引种作为覆盖植物丛生于路旁、溪边的阴凉润湿处，亦见于潮湿草甸或林地，高10-30cm,基部匍匐，叶对生，花期37月，果期5-11月。广泛分布于我国南方,资源极为丰富。筋骨草性寒、味苦，归肺经，为全草类中药，据本草纲目拾遗记载，筋骨草具有止咳化痰、清热凉血、解毒消肿、止痢的功效。四川中药志记载，筋骨草可治妇女月事痛。民间用于治疗慢性支气管
8、炎、风热咳嗽、外伤等。结合筋骨草的性味归经及功效，本研究在慢性宫颈炎的治疗方法探索中具有实际意义,从而为开发我国丰富的筋骨草资源奠定基础。I材料与方法1.1 材料与药品筋骨草水煎液（取四川南充产筋骨草全草浸泡30min,煎煮至沸后调至文火，继续煎煮1520min,同法煎煮两次，合并药液后浓缩至需用浓度。试验鼠为清洁级SD大鼠，雌性、未孕，体重160-180g（由川北医学院实验动物中心提供，合格证号：SYXK（川）2013-076）。屏随环境饲养。苯酚购自成都豪乙生物有限公司，阿拉伯树胶购自成都荣之源生物有限公司，苯酚胶浆现用现配（取苯酚5g,阿拉伯树胶15g,加蒸储水至20ml,配成25%的苯
9、酚胶浆）。大展PGEz放免试剂盒购自上海西唐生物科技有限公司，地塞米松磷酸钠注射液购于成都第一药业有限公司。1.2 造模与给药采用范英昌等报道的方法，SD大鼠适应性喂养一周后，腹腔注射3%的戊巴比妥钠lmlkg麻醉，以头低尾高的体位固定，将0.5ml玻璃注射器（用灌胃针头）轻轻插入大鼠阴道内约3-4mm处，向其中缓慢注入苯酚胶浆0.2ml,使用医用无菌棉签堵塞阴道口，保持体头低尾高位5min后放回笼内，每隔2天注射1次，连续5次4。造模成功表现为大鼠阴道红肿并伴有黄白色分泌物。将大鼠随机分为6组：空白组（10只），模型组（10只），筋骨草低（4gkg,10只）、中（8gkg,10只）、高剂量（
10、12gkg,10只）组，地塞米松组（4mgkg,10只）。给药组从第一次注射造模后第3天开始灌胃，同时模型组和空白对照组灌服生理盐水（IOmIkg）,连续给药15天。1.3 大鼠活动观察观察大鼠一般情况，阴道口是否干燥，外阴及阴道口粘膜有无红肿，阴道有无分泌物。1.4 宫颈指数及其组织病理学检查末次给药后24小时处死大鼠（杀剖前禁食禁水4h）,取出阴道至子宫角处组织，分离宫颈（子宫阴道部开口与双子宫分叉交界处）后精密称定，计算宫颈指数。分离部分宫颈组织备检，用10%中性甲醛固定，常规石蜡包埋切片，HE染色，镜下观察宫颈组织病理变化情况。1.5 宫颈组织PGE2测定即刻用液氮冷冻部分宫颈组织，精
11、密称定3-6mg于微型匀浆器中，加无水乙醇0.4ml研磨，再加生理盐水1.6ml制成匀浆，3000rmp,4C离心15min,吸出上清液，-80C保存。按放免试剂盒说明书检测PGE2的含量。1.6 统计学分析实验数据以（Xs）表示，采用差异显著性统计分析（用SPSSI3.0软件进行统计），以P0.05为差异具有统计学意义。2结果与分析2.1 大鼠活动观察空白组大鼠活动正常，外阴洁净，阴道口无红肿。模型组动物扎堆倦卧，毛发蓬松，大多数外阴可见大量黄色或白色的浓稠分泌物，阴道口红肿，少数阴道有流血。筋骨草组可见白色分泌物，阴道口粘膜红肿程度较模型组明显减轻。2.2 宫颈脏器指数测定结果及组织病理学
12、检查空白组大鼠宫颈指数最大值为0.4150,最小值为0.3480,模型组宫颈指数最大值为0.5524,最小值为0.5000,与空白组比较，模型组宫颈指数显著升高（PVOQl）。筋骨草组宫颈指数最大值为0.5014,最小值为0.4185,与模型组相比，筋骨草低、中剂量组达显著差异水平（P0.05）,高剂量组达极显著差异水平（Pn=10)组别脏器指数（。）空白对照组0.40920.0808模型组0.51910.0177*地塞米松组O.4357O.O133低剂量组0.48560.0136中剂量组0.48280.0130高剂量组0.46010.0213*P0.05,与空白对照组比较；P0.05,与模型
13、组比较；gP0.05,与筋骨草高剂量组比较有显著差异。宫颈指数1.60IllllI空白斑帙型西药组-低组筋中阻筋一组图1各组大鼠宫颈指数（。）比较Figure8Comparationofcervicalindexinrats与空白组比较，模型组宫颈组织鳞状上皮明显增生，炎性细胞浸润明显，说明宫颈炎模型复制成功。与模型组比较，筋骨草组病变有所减轻，其中高剂量组炎细胞浸润程度最低,结果如图2所示。图2大鼠宫颈组织病理变化(HEX20)Figure9CervicaltissuepathologicalchangesinratsK:空白对照组;M:模型组;X泗药组;Jl:低剂量组;J2:中剂量组;J3
14、:高剂量组2.3宫颈组织PGE2测定空白组大鼠宫颈组织PGE2最大值为600.03pgml,最小值为569.85pgml,模型组PGE2最大值837.82pgml,最小值为769.48pgml,方差分析表明模型组与空白组宫颈组织PGE2含量达极显著差异水平(P0.01)o筋骨草组PGE2最大值为750.46pgml,最小值为66829pgml,与模型组比较，达极显著差异水平(P0.01)；与筋骨草高剂量组相比，低剂量组PGE2含量达极显著差异水平(P0.01),中剂量组未达显著差异水平，结果见表2、图3。表2各组大鼠宫颈组织中PGEz含量比较(xs,n=10)Table5Comparation
15、ofPGE2incervicaltissue(Xs,n=10)组别PGE2(pgml)空白对照组609.84+22.67模型组796.58+21.30*地塞米松组673.5113.31低剂量组734.2410.44中剂量组708.391736高剂量组679.7466.32V0.05,与筋骨草高剂量组比较有显著差异。Figure10ComparationofPGE2incervicaltissue3讨论PGE2是由于局部组织细胞受到刺激而产生的炎性介质，可增强毛细血管通透性，从而进一步引起炎症反应性水肿和渗出，降低PGE2的生成将显著改善局部炎症。血液中的PGE2很快失活，而炎症组织中的PGE2却能保持恒定水平，因此，直接测定宫颈组织中PGE2的表达，更能说明炎性反应的程度。地塞米松是一种临床上仍广泛应用的长效糖皮质激素，在抗炎药物开发中其作为阳性对照具有常见性。本试验基于筋
