脉冲场电泳仪操作规程.docx

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1、脉冲场电泳仪操作规程1 .在电泳槽内加入约2.2升合适的电泳缓冲液。2 .打开主机开关,待主机自检结束后,打开循环泵开关,使电泳缓冲液开始循环,泵的速度设在“70”左右。然后开启冷凝系统开关,按“settemp”键设置所需电泳温度,按“actualtemp”显示实际温度。3 .灌胶,等胶凝固后,上样4 .待电泳缓冲液到达设置的温度后,将加好样的凝胶连同底座一起放入电泳槽内的黑色方框内,并保证电泳缓冲液超过胶面b2三,盖好电泳槽盖AUrOALGORITHM5 .在主机上设置电泳程序,先选择采用哪种类型程序,例如最常用的TWoState方法:FIGETWOSTATEMULTISTATE(1)按TW

2、OSTATE键,屏幕显示aYouwilldestroythelastprogram-Goon?,输入1”确认后,系统显示/一、Gradient三VcmRunTime三IncludedAngle=0输入相应的参数后,按ENTER键,屏幕显示lnt.Sw.Tm=.FinSw.Tm=.IRampingfactor:a=.输入相应的参数后,按ENTER键确认(其中RamPingfactor默认是线性增长,如果欲采用默认值直接回车即可)。CHEFMapper屏幕会显示AProgramisinmemory.Pleaseenteranothercommand.若需存储程序,按SToREPGM进行存储。按ST

3、ARTRUN即开始运行,此时可观察到电泳槽内电极开始出现气泡。(2)如选用autoalgorithm方法,按“autoalgorithm,键,键入欲得到的线性范围的最大片段和最小片段的kb数,确认所有给出参数,按“startrun”键,即可进行电泳。(3)如选用MUItiState及FIGE方法,请参阅说明书。6 .电泳开始后,“highVoltage”灯亮,此时切不可打开电泳槽盖进行操作,以免发生触电危险。7 .电泳结束后,highVoItage”灯灭。依次关掉冷凝系统,主机开关,然后可取出凝胶,染色观察。最后放出使用过的电泳缓冲液,若长时间不用,需用蒸循水循环冲洗系统,晾干。8 .结束实验后,及时关闭仪器。

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