丙烯酰胺对小鼠的毒性作用.docx

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1、【实验研究】文章编号:100120580(2004)0520569202中图分类号:R99413文献标识码:B丙烯酰胺对小鼠的毒性作用孙凤祥、赵泮梅2,杨晓云3丙烯酰胺(AAM)是工业、国防上应用较广泛的一种化工产品。主要用于树脂合成、地下建筑、粘合剂、堵水、造纸等行业。在实验室,它常作为电泳实验材料,由于人群接触广泛,因而造成的职业危害也较严重。AAM对人体有一定的神经毒作用以近IU年来生产性中毒屡见不鲜病例报道约有300余例(征象也为融咨W装现对机体的毒油/蹦病蛭临廉毒小鼠进行了实验研究。1材料和方法111受试物AAM由上海化学试剂公司生产,化学纯,试剂批号986419,纯度9815%。1

2、12检测指标血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST).乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸的(ACP)、,谷酰转肽酶(GGT)、a羟丁酸脱氢酶(HHDH)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN),TO(SCR)s尿酸(UA)、肌酸激酶(CK)、无机磷(POa-)和钙(Ca2-)o试剂由Beckman公司提供,以BeckmanCX4型自动生化分析仪进行分析。113动物分组与处理选择体重2024g健康BALB/C小鼠40只.雌雄各半.均由本院实验动物中心提供.按体重随机分为对照组、50,100,150mgkg染毒组,每组10只,染毒组按等体

3、积不同浓度用蒸镭水配成AAM稀释液,染毒前现用现配,对照组给予等体积的生理盐水,每日灌胃1次。每周5次同时观察行为及体重变化。对照组与实验组均正常饲养6周后进行断头取血、进行指标分析。114组织病理学检查实验动物断头处死,取出脑、脊髓,用10%甲醛固定,常规脱水,石蜡包埋切片,HE染色,观察其组织结构形态改变。2结果211AAM染毒小鼠行为及体重改变150mgkg染毒组在染毒期间死亡1只,各染毒组随染毒剂量递增,染毒小鼠有躁动、激惹现象.继而倦怠.懒动,染毒第3周发现100,150mgkg染毒组小鼠前后肢肌肉萎缩,肌力下降,体重与对照组比较有所下降,对照组净增重量为(51342116)g,50

4、,100,150mgkg组净增重量分别为(31831137)g,(2149+1185)g,(1126+1167)go经统计处理100,150mg/kg组与对照组比较有非常显著性差异(尸0105,33P0101溜1第翻理既神经细表1结果显示,AAM染毒小鼠血清酶学指标,AST、LDH、ALP、CK活性明显升高,100,150mg/kg染毒组分别与对照组比较、有非常显著性差异(P010l).血清非酶学指标BUN、UA、SCR、TBIL、DBIL含量升高,100,15Omgkg染毒组分别与对照组比较有显著性差异(P0105)。213病理组织学检查大体剖检后肉眼观察,染毒组小鼠的肝、脾、肾广泛性水肿伴

5、有少量出血点。脊髓在光镜下显示作者单位:11潍坊医学院化学分析实验室,潍坊261042;21潍坊医学院附属潍坊市人民医院;31潍坊医学院生化教研室作者简介:孙凤祥(1963-).男,山东潍坊人,实验师,主要从事生化实玲教学、科研工作。50,150mg/kg染毒组小鼠脊髓膜均呈广泛性充血和少量炎性细胞浸润,以淋巴细胞为主,脊髓前角充血,水肿明显,灰质内运动神经元有不同程度的水肿,尼氏小体(NiSSI)溶解,细胞浓缩,少量细胞溶解,伴有淋巴细胞浸润,小胶质细胞轻度增生,部分运动细胞有坏死。150mg/kg染毒组小鼠除上述病理改变外,脊髓白质水肿明显,神经纤维肿胀并伴有脱髓脱鞘现象,小胶质细胞增生。

6、小脑、大脑光镜下显示50mg/kg染毒组无异常改变,100胞肿胀伴有神经突起减少张充血,大脑细胞周围间隙略增大,呈轻度水肿变化。对照组小鼠各脏器未见异常。3雌本实验观察到,各染毒小鼠随染毒剂量递增和毒物蓄积,染毒小鼠有躁动、激惹现象,继而倦怠,懒动,染毒第3周发现100,150mgkg染毒组小鼠前后肢肌肉萎缩.肌力下降,染毒组小鼠体重与行为及症状改变,可能与AAM的神经毒性有关,与文献报道基本一致Q)。病理组织学观察发现病理损害主要在中枢神经系统。提示AAM急性中毒后,可使神经细胞产生炎性水肿,最终导致细胞死亡,产生不可恢复的神经系统损坏、是临床上中枢神经系统功能障碍和神经症状表现的病理基础。

7、毒物对脏器职业性损伤一般多从酶学指标和非酶学指标来判断.因为每一种职业性毒物都有一定的亲和性和专一性本实验结果表明,AAM对染毒小鼠血清某些酶学指标和非酶学指标有不同程度的影响。AAM对染毒小鼠造成器官损伤后血清大多数酶学指标变化较明显,如AST、LDH、ALP、CK活性明显升高,非酶学指标TBIL、DBIL、UA、BUN也有不同程度的升高,说明AAM对心、肝、肾有一定的毒性。关于TBIL.DBIL,一般认为是胆红素代谢过程中的代谢产物9,其增高的原因可能是由于AAM使染毒小鼠体内的氧化应急反应和胆红素的抗氧化作用增强所致。本实验结果提示,接触一定量的AAM可有全身性损伤作用。参考文献:(1)

8、夏元洵.化学物质毒性全书M一上海:上海科技文献出版社,1991.264.R王慧兰,聂兴田,李风玲.丙烯酰胺中毒原因分析J.中华劳动卫生职业病杂志.1997.15(5):265.R徐强绪.丙烯酰胺中毒12例分析川.中国工业医学杂志.1996.9(2):121.8江泉观毒理学ML北京:化学工业出版社,199L83107.5)叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程M.南京:东南大学出版社,1992.228-233.收稿日期:2003211203(宋枪条身辑郭长胜校对)【实验研究】文堂编号:100l20580(2004)0520570202中图分类号:15”3文献标识码:A硒对环氧化酶2mRNA表达的影

9、响王舒然I,杨宝峰、孙长颖二暴永平2摘要:目的观察硒对肿瘤发生密切相关的环氧化酶2(CoX-2)表达的影响。方法选用人结肠癌细胞系HT-29,采用定量PCR方法测定不同剂量(0125,015,IlOaoI/L)硒在4.8和24h对COX-2mRNA表达的影响。结果硒在015和110加ol/L剂量作用24h条件下,对HT-29的COX-2mRNA表达有下调作用,其中0150aolL是最佳作用剂量。结论硒通过下调COX-2mRNA表达,发挥癌症预防作用。为科学饮食预防癌症和将硒作为抗癌药物进行开发提供理论依据。关键词:硒:环氧化酶-2(COX-2);定量PCREffectsofSeonCOX-2m

10、RNAexpressionWANGShu2ran.YANGBao2feng,SUNChang2lao.etal.DepartmentofNutritionandFoodHygiene.HarbinMedicalUniversity(Harbin150001,China)AbStraCt:ObjectiveTbinvestigateeffectsofSe,intheformofsodiumselenite,onCOX-2mRNAexpression,acan2cercloserelatedgene.MethodsTheamountOfCOX-2mRNAofHT229cells,whichwere

11、culturedinDMEMcontainingtheconcentrationof250,500and1000nmol/LSefor4,8and24h,wasdetectedtyrealtimePCR.ResultsTheCXPresiS沁nofCOX-2mRNAweredownregulatedsignificantlyby500andI000nmol/LSefor24hours.ConclusionSehadchemo2protectiveeffectonhumancoloncancerthroughdownregulatingCOX-2geneexpressionanddidgdtom

12、anssuitabledietandofferabackgroundfordeveloingSeanticancerdrug.KCywords:Se;COX-2;realtimePCR硒缺乏和活性氧物质的存在能增加心肌病、类风湿和肿瘤发生的危险性国内外的人群流行病学调查表明皿清硒的水平与消化道肿瘤的死亡率呈负相关A补硒能明显降低多种肿瘤的死亡率8。高剂量的硒能抑制血管内皮生长因子诱导的肿瘤。动物实验、临床研究和流行病学研究均表明补硒可以抑制肿瘤的生长。但是硒预防肿瘤发生发展的机制尚不清楚.环氧化酶(COX)是前列腺素合成的限速酶。有两种同工酶:COX-I具有看家基因的功能.很少发生变化。CoX

13、-2可在损伤或发生炎性反应时被诱导。许多的肿瘤都存在CoX-2的过度表达.临床干预试验、流行病学调查和作者单位:Il哈尔滨医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室.哈尔滨150001;21英国食品研究所作者简介:王舒然(1968-).男.黑龙江人.副教授、博士,主要从事营养与慢性病分子机制的研究。动物实验发现,在结肠中抑制COX-2具有预防结肠癌的作用叽最近的研究表明,含硒高的绿花椰菜能抑制化学物诱导的大鼠结肠癌和降低小鼠肠道肿瘤的发生率本研究选用人类结肠癌细胞系HT-29细胞、研究硒降低结肠癌的作用是否是通过抑制COX-2基因表达而实现的。1材料与方法Hl试剂和仪器细胞培养液:Invitrogen(Gib),(Paisley,UK)。亚硒酸钠:Sigma(UK)0COX-2mRNA弓|物:SigmaGenosys(Cambridge,UK)oCOX-2mRNA探针:5-FAMand3-TAMRA修饰探针订购于AppliedBiosystems(War2rington,UK)。GenElute哺乳动物总RNA提取试剂盒.Sig2

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